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日期:2021-09-02瀏覽:3395次
去除核酸可以改善蛋白質(zhì)純化過(guò)程中的工作流程,包括實(shí)驗(yàn)室樣品制備和工業(yè)生物處理。HL-SAN 是一種非特異性核酸內(nèi)切酶,在高鹽濃度下具有最佳活性。HL-SAN 在多種緩沖液中均具有活性,并且可以通過(guò)還原劑處理輕松滅活。這些特性使 HL-SAN 特別適用于蛋白質(zhì)的純化以及從分子生物學(xué)試劑中去除 DNA 和 RNA。
核酸,尤其是基因組 DNA,通常會(huì)在 DNA 結(jié)合蛋白的純化中造成問(wèn)題,因?yàn)樗鼈儠?huì)干擾純化、下游分析或應(yīng)用。
由于大多數(shù)核酸酶受到高濃度鹽的抑制,因此很難去除 DNA,因?yàn)?NaCl 用于從蛋白質(zhì)中分離 DNA。
高耐鹽性和易去除性使 HL-SAN 有利于在蛋白質(zhì)純化方案中使用,特別是與 IMAC(固定化金屬親和層析)介質(zhì)結(jié)合使用,用于在常規(guī)層析或高通量中純化多組氨酸標(biāo)記的蛋白質(zhì)設(shè)置。
來(lái)源 | 在畢赤酵母中重組生產(chǎn)。 |
活動(dòng) | HL-SAN 在 10–50°C 的溫度范圍內(nèi)高度活躍。活動(dòng)的最佳 NaCl 濃度為 0.5 M,工作范圍為 0.25–1 M。活動(dòng)需要Mg 2+ (>1 mM)。工作 pH 范圍為 7.5-9.5,最佳 pH 值為 9.0。 |
具體活動(dòng) | ≥ 175 000 單位/毫克 |
單位定義 | 1 單位定義為在 37°C 下 30 分鐘內(nèi) 1 A 在 260 nm 處的吸光度增加,使用 50 μg/ml 小牛胸腺 DNA(D-1501,Sigma)在由 25 mM Tris-HCl 組成的緩沖液中,pH 8.5 (25°C)、5 mM MgCl 2、500 mM NaCl。 |
咪唑 | 20% 活性在 350 mM 咪唑 |
甘油 | 35% 甘油時(shí) 20% 活性 |
海衛(wèi) X-100 | Triton X-100 的活性沒(méi)有降低(測(cè)試高達(dá) 15%) |
安全數(shù)據(jù)表 | 不建議 |
尿素 | 不建議 |
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